血清乙型肝炎病毒e抗体检测(ELISA)作业指导书.docx
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1、血清乙型肝炎病毒e抗体检测(ELISA)作业指导书1 .原理在微孔条上预包被被纯化乙肝e抗体(HBeAb),配以酶标记抗原(HBeAb-HRP)、 中和抗原(HBeAg)及TMB等其它试剂,采用竞争法原理检测人血清(或血浆) 中乙肝e抗体(HBeAb)o2 .标本采集2. 1采集前病人准备:受检者应空腹。2. 2标本种类:血清或血浆。2 . 3标本要求:采集病人静脉血3ml (可用EDTA抗凝),室温放置不超过4小时, 分离血清备用。3 .标本储存:2-8保存不应超过24小时,-20不应超过3个月,-70长期保存,应避免反复冻融。4 .标本运输:密封,室温运输。5 .标本拒收标准:污染、标本量
2、不足、严重溶血或脂血标本不宜作此项检测。6 .试剂6. 1试剂名称:乙型肝炎病毒e抗体诊断试剂盒6.2试剂生产厂家:英科新创(厦门)科技有限公司。6. 3 包装规格:96Test/Kit7. 4试剂盒组成:HBeAb微孔板,HBeAb酶标记抗原,中和抗原,HBeAb阳性对照血清,HBeAb 阴性对照血清,浓缩洗涤液,底物A,底物B,终止液,封口膜,自封袋。6. 5试剂储存条件及有效期:2-8。避光保存,有效期9个月。7.仪器设备7. 1仪器名称:自动酶标仪7. 2仪器厂家:Rayto8. 3仪器型号:RT-2100C8.操作步骤8. 1平衡:将试剂盒各组分取出,平衡至室温(18-25 ),微孔
3、板开封后,余者及时以自封袋封存。8. 2配液:浓缩洗涤液配制前充分摇匀(如有晶体应充分溶解),浓缩洗涤液和 蒸储水或去离子水按1: 19稀释后使用。8.3 编号:将微孔条固定于支架,按序编号。8.4 加样:分别用加样器在对照孔中加入阴、阳性对照血清各50|il于相应孔中。8. 5加酶:分别在每孔中加入酶标记抗体50口,轻拍混匀。8. 6中和:分别在每孔中加入中和抗原(HBeAg) 50口,轻拍混匀。8. 7温育:置37温育60分钟,室温平衡5分钟。8. 8洗涤:用洗涤液充分洗涤5次,洗涤完扣干(每次应保持30-60秒的浸泡时 间)。8. 9显色:每孔加入底物A、B各50口,轻拍混匀,置37暗处
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