血清碱性磷酸酶ALP测定.doc
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1、血清碱性磷酸酶ALP测定1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。2 实验原理 本试剂以国际临床化学会(IFCC)推荐方法为基础,所采用的反应原理与反应式如下。 ALP 对-硝基苯磷酸盐 + H2O - 对硝基酚 + 磷酸 在上述反应中,对-硝基苯酚的生成速率与样本中碱性磷酸酶的活力成正比。通过在405 nm处监测吸光度的上升速率,即可测得样本中碱性磷酸酶的活性。 3 标本采集与处理:3.1 病人准备:无特殊要求。3.2 标本类型:标本最好是无溶血的血清。3.3 血清分离:应在收集后两小时内分离出来。避免使用含EDTA或草酸盐的血浆。3.4 标本存放:23天内的活性
2、损失:1525保存:10%;标本稳定性:48保存稳定7天;-20保存至少可稳定2个月标本。如果分析延迟8小时以上,最好把血清冷藏。冷冻的血清在融解后会表现出血清值的显著降低。3.5 标本运输:常温条件下运输3.6 标本拒收标准:细菌污染的不能做测定。4 实验材料:4.1 试剂:上海复星长征医学科学有限公司ALP试剂盒(沪食药监械(准)字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014)4.1.1 试剂组成试剂1(R1): 乙酸镁 3.0mmol/L 硫酸锌 1.5mmol/L HEDTA3.0mmol/L AMP缓冲液 420mmol/L试剂2(R2): 对-硝基苯磷酸盐81.
3、5mmol/L AMP缓冲液 420mmol/L HEDTA 5.0mmol/L 4.1.2 试剂准备:试剂为即用式。4.1.3 试剂稳定性与贮存:在28避光、密封的储存条件下,试剂(盒)自生产之日起有效期为12个月。 试剂启用后,在210避光的条件下可稳定14天。4.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。4.1.5 注意事项:试剂中含有稳定剂,可能存在一定的刺激作用或毒性,请勿直接接触皮肤、眼睛。一旦接触,即用大量清水冲洗。请勿吞服。4.2 校准品:使用上海复星长征医学科学有限公司提供的ALP校准品对自动分析仪进行校准。4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。
4、5 仪器 AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。6.4仪器操作步骤:参见生化检验AU2700生化分析仪,罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪,东芝TBA-120生化分析仪操作规程
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