蛋白质和核酸含量.ppt
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1、蛋白质含量的测定方法蛋白质含量的测定方法一、凯氏定氮法一、凯氏定氮法用于Pro含量测定最经典的方法。它是根据Pro平均含氮量16%,因此只要测出样品的含氮量即可知含量。仪器:仪器:1.安全管安全管 2.导管导管 3.汽水分离管汽水分离管 4.样品入口样品入口 5.塞子塞子 6.冷凝管冷凝管 7.吸收瓶吸收瓶 8.隔热液套隔热液套 9.反应管反应管 10.蒸汽发生瓶蒸汽发生瓶 定氮蒸馏装置定氮蒸馏装置试剂:试剂:所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制1.硫酸铜硫酸铜2.硫酸钾硫酸钾3.硫酸硫酸 4.2%硼酸溶液硼酸溶液 5.混合指示液:混合指示液:1份份0.1%甲基红乙醇溶
2、液与甲基红乙醇溶液与5份份 0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份份0.1%甲基红乙醇溶液与甲基红乙醇溶液与1份份0.1%次甲基蓝乙醇溶次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。液临用时混合。6.40%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液 7.0.025mol/L硫酸标准溶液或硫酸标准溶液或0.05mol/L盐盐 二:福林酚法二:福林酚法 FOLIN-酚试剂可以和游离的酪蛋白螯合,酚试剂可以和游离的酪蛋白螯合,呈蓝色,可以通过呈蓝色,可以通过OT检测,判断溶液中的检测,判断溶液中的游离酪蛋白含量。游离酪蛋白含量。灵敏度高,重复性好.颜色深,析光度大.三、双缩脲法三、双缩脲法试剂:试剂:四、紫外吸收法四、紫外吸收法Pro在280nm处有最大吸收峰,测定的适当浓度在0.10.5 ug/ml试剂:试剂:五、五、BCA比色法比色法 在PH大于7时,Pro与Cu2+反应后再与BCA试剂生成紫色复合物,在562nm处有最大吸收值。试剂:试剂:六:染料结合法六:染料结合法 Pro与考马斯亮兰的结合物在595nm处有最大吸收值。
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- 关 键 词:
- 蛋白质 核酸 含量
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