血清-谷氨酰转移酶(-GGT)速率法测定.docx
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1、血清丫一谷氨酰转移酶(y-GGT)速率法测定1.实验原理GGT催化谷氨酰基转移给受体的反应。本法以厂谷氨酰-3-竣基-对硝基苯胺为底物, 将底物上的谷氨酰基转移至受体双甘肽,生成对硝基苯胺和厂谷氨酰双甘肽。在405nm进 行吸光度检测,吸光度升高的速率与标本中GGT活力成正比。y-谷氨酰-3-竣基-对硝基苯胺+双甘肽GGT对硝基苯胺+厂谷氨酰双甘肽A2 .标本:3 . 1病人准备:无特殊。4 . 2类型:血清或EDTA血浆。5 .标本存放:室温可保存8小时;28c可保存3天;-20保存至少可稳定1周。6 .标本运输:常温条件下保存运输。7 .标本拒收标准:细菌污染的标本。8 .实验材料6. 1
2、试剂 利德曼厂GGT测定试剂盒(试剂1 6X64ml试剂2 6X 16ml)6. 1. 1试剂组成试剂1 ( R1):Tris缓冲液pH8.251OOmmo1/L甘氨酰甘氨酸150mmo1/L试剂2 (R2):6.6.6.广谷氨酰-3-竣基-对硝基苯胺1.2试剂准备:试剂为即用式。1. 3试剂稳定性与贮存:试齐1J保存于2.9mmol/L28 ,若无污染,可稳定至失效期。1.4变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。6. 1. 5注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘 膜。应采取必要的预防措施
3、使用试剂。6.2校准品:使用DiaSys公司提供的TruCal U校准品对自动分析仪进行校准,具体参见 生化检验校准品和质控品.SOP文件。6 . 3质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。7 .仪器:奥林巴斯AU1OOO生化分析仪8 .操作步骤8. 1项目基本参数:参见AU1OOO生化分析仪项目测定参数.SOP文件8 . 2仪器操作步骤:参见AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件9 .检验结果的判断与分析10 .质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与n质控做为未知标本进行分 析,以2s为质控警告限,3s为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见室内 质控操作规
4、程.SOP文件。11 .计算方法:以TruCal U复合校准品GGT校准值校准仪器后,在病人结果可报告范围 内,仪器直接报告可靠的检测结果。不使用校准品进行GGT活力检测,可以直接使用 A/min均值乘以计算因子得到结果, 但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算GGT活力的计算因子见下表: A/minX 因子=GGT 活力U/L底物起始的反应(37) 样品起始的反应(37)405nm1421115812 .参考值范围3 4:女性7-32U/L;男性11-49U/L。参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实 验室应建立自己的参考值。13 .临床意义:厂谷氨
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